Medium yang dapat digunakan untuk menumbuhkan virus yaitu

Medium yang dapat digunakan untuk menumbuhkan virus yaitu

Medium yang dapat digunakan untuk menumbuhkan virus yaitu

Jawaban dari judul artikel medium yang dapat digunakan untuk menumbuhkan virus yaitu adalah embrio hewan, misalnya embrio ayam. Untuk lebih jelasnya, silahkan baca terus artikelnya.

Tidak seperti bakteri, banyak yang dapat tumbuh pada media nutrisi buatan, virus membutuhkan sel inang hidup untuk replikasi. Sel inang yang terinfeksi (eukariotik atau prokariotik) dapat dibiakkan dan ditumbuhkan, kemudian media pertumbuhan dapat dipanen sebagai sumber virus. Virion dalam media cair dapat dipisahkan dari sel inang dengan sentrifugasi atau filtrasi. Filter secara fisik dapat menghapus apa pun yang ada dalam larutan yang lebih besar dari virion; virus kemudian dapat dikumpulkan dalam filtrat.

medium yang dapat digunakan untuk menumbuhkan virus yaitu
medium yang dapat digunakan untuk menumbuhkan virus yaitu

Virus dapat tumbuh secara in vivo (di dalam organisme hidup, tumbuhan, atau hewan secara keseluruhan) atau in vitro (di luar organisme hidup dalam sel dalam lingkungan buatan). Labu kultur sel horizontal datar adalah wadah umum digunakan untuk pekerjaan in vitro Bakteriofag dapat ditumbuhkan dengan adanya lapisan bakteri yang padat (juga disebut rumput bakteri) yang ditumbuhkan dalam agar lunak 0,7% dalam cawan Petri atau labu datar (horizontal) . Saat fag membunuh bakteri, banyak plak diamati di antara halaman bakteri yang keruh.

Virus hewan memerlukan sel di dalam hewan inang atau sel kultur jaringan yang berasal dari hewan. Budidaya virus hewan penting untuk 1) identifikasi dan diagnosis virus patogen dalam spesimen klinis, 2) produksi vaksin, dan 3) studi penelitian dasar. Sumber inang in vivo dapat berupa embrio yang sedang berkembang dalam telur burung berembrio (misalnya, ayam, kalkun) atau hewan utuh. Misalnya, sebagian besar vaksin influenza yang diproduksi untuk program vaksinasi flu tahunan dibiakkan dalam telur ayam.

Embrio atau hewan inang berfungsi sebagai inkubator untuk replikasi virus. Lokasi di dalam embrio atau hewan inang adalah penting. Banyak virus memiliki tropisme jaringan, dan karena itu harus dimasukkan ke dalam situs tertentu untuk pertumbuhan. Di dalam embrio, situs target termasuk rongga amnion, membran chorioallantoic, atau kantung kuning telur. Infeksi virus dapat merusak membran jaringan, menghasilkan lesi yang disebut cacar; mengganggu perkembangan embrio; atau menyebabkan kematian embrio.

Untuk penelitian in vitro, berbagai jenis sel dapat digunakan untuk mendukung pertumbuhan virus. Kultur sel primer baru dibuat dari organ atau jaringan hewan. Sel diekstraksi dari jaringan dengan pengikisan atau pengirisan mekanis untuk melepaskan sel atau dengan metode enzimatik menggunakan tripsin atau kolagenase untuk memecah jaringan dan melepaskan sel tunggal ke dalam suspensi.

Karena persyaratan ketergantungan penjangkaran, kultur sel primer memerlukan media kultur cair dalam cawan Petri atau labu kultur jaringan sehingga sel memiliki permukaan padat seperti kaca atau plastik untuk perlekatan dan pertumbuhan. Budaya primer biasanya memiliki rentang hidup yang terbatas. Ketika sel-sel dalam kultur primer menjalani mitosis dan kepadatan sel yang cukup dihasilkan, sel-sel bersentuhan dengan sel-sel lain.

Ketika kontak sel-ke-sel ini terjadi, mitosis dipicu untuk berhenti. Ini disebut penghambatan kontak dan mencegah kepadatan sel menjadi terlalu tinggi. Untuk mencegah penghambatan kontak, sel-sel dari kultur sel primer harus dipindahkan ke wadah lain dengan media pertumbuhan segar. Ini disebut kultur sel sekunder. Secara berkala, kepadatan sel harus dikurangi dengan menuangkan beberapa sel dan menambahkan media segar untuk memberikan ruang dan nutrisi untuk mempertahankan pertumbuhan sel.

Berbeda dengan kultur sel primer, garis sel kontinu, biasanya berasal dari sel atau tumor yang ditransformasi, seringkali dapat disubkultur berkali-kali atau bahkan ditumbuhkan tanpa batas (dalam hal ini disebut abadi). Garis sel kontinu mungkin tidak menunjukkan ketergantungan penjangkaran (mereka akan tumbuh dalam suspensi) dan mungkin telah kehilangan penghambatan kontaknya. Akibatnya, garis sel terus menerus dapat tumbuh dalam tumpukan atau benjolan menyerupai pertumbuhan tumor kecil.

Contoh garis sel abadi adalah garis sel HeLa, yang awalnya dibudidayakan dari sel tumor yang diperoleh dari Henrietta Lacks, seorang pasien yang meninggal karena kanker serviks pada tahun 1951. Sel HeLa adalah garis sel kultur jaringan berkelanjutan pertama dan digunakan untuk menetapkan kultur jaringan sebagai teknologi penting untuk penelitian dalam biologi sel, virologi, dan kedokteran.

Sebelum penemuan sel HeLa, para ilmuwan tidak dapat membuat kultur jaringan dengan keandalan atau stabilitas apa pun. Lebih dari enam dekade kemudian, garis sel ini masih hidup dan digunakan untuk penelitian medis. Lihat Eye on Ethics: Garis Sel Abadi Henrietta Lacks untuk membaca lebih lanjut tentang garis sel penting ini dan cara kontroversial yang digunakan untuk mendapatkannya.

Pada bulan Januari 1951, Henrietta Lacks, seorang wanita Afrika-Amerika berusia 30 tahun dari Baltimore, didiagnosis menderita kanker serviks di Rumah Sakit Johns Hopkins. Kita sekarang tahu kankernya disebabkan oleh human papillomavirus (HPV). Efek sitopatik virus mengubah karakteristik selnya dalam proses yang disebut transformasi, yang memberi sel kemampuan untuk membelah terus menerus. Kemampuan ini, tentu saja, menghasilkan tumor kanker yang akhirnya membunuh Mrs. Lacks pada bulan Oktober di usia 31 tahun.

Sebelum kematiannya, sampel sel kankernya diambil tanpa sepengetahuan atau izinnya. Sampel akhirnya menjadi milik Dr. George Gey, seorang peneliti biomedis di Universitas Johns Hopkins. Gey mampu menumbuhkan beberapa sel dari sampel Lacks, menciptakan apa yang sekarang dikenal sebagai garis sel HeLa yang abadi. Sel-sel ini memiliki kemampuan untuk hidup dan tumbuh tanpa batas dan, bahkan hingga saat ini, masih banyak digunakan di banyak bidang penelitian.

Menurut suami Lacks, baik Henrietta maupun keluarga tidak memberikan izin rumah sakit untuk mengambil spesimen jaringannya. Memang, keluarga tidak menyadari sampai 20 tahun setelah kematian Lacks bahwa sel-selnya masih hidup dan secara aktif digunakan untuk tujuan komersial dan penelitian. Namun sel HeLa telah menjadi sangat penting dalam berbagai penemuan penelitian yang berkaitan dengan polio, kanker, dan AIDS, di antara penyakit lainnya.

Sel-sel juga telah dikomersialkan, meskipun mereka sendiri tidak pernah dipatenkan. Meskipun demikian, warisan Henrietta Lacks tidak pernah mendapat manfaat dari penggunaan sel, meskipun, pada tahun 2013, keluarga Lacks diberi kendali atas publikasi urutan genetik selnya.

Kasus ini mengangkat beberapa isu bioetika seputar persetujuan pasien dan hak untuk tahu. Pada saat jaringan Lacks diambil, tidak ada undang-undang atau pedoman tentang persetujuan yang diinformasikan. Apakah itu berarti dia diperlakukan dengan adil pada saat itu? Tentu saja menurut standar saat ini, jawabannya adalah tidak. Pengambilan jaringan atau organ dari pasien yang sekarat tanpa persetujuan tidak hanya dianggap tidak etis tetapi juga ilegal, terlepas dari apakah tindakan tersebut dapat menyelamatkan nyawa pasien lain.

Jadi, apakah etis bagi para ilmuwan untuk terus menggunakan jaringan Lacks untuk penelitian, meskipun jaringan tersebut diperoleh secara ilegal menurut standar saat ini?

Etis atau tidak, sel-sel Lacks banyak digunakan saat ini untuk begitu banyak aplikasi sehingga tidak mungkin untuk mencantumkan semuanya. Apakah ini kasus di mana tujuan membenarkan cara? Apakah Lacks akan senang mengetahui tentang kontribusinya pada sains dan jutaan orang yang telah mendapat manfaat? Apakah dia ingin keluarganya mendapat kompensasi untuk produk komersial yang telah dikembangkan menggunakan selnya?

Atau akankah dia merasa dilanggar dan dieksploitasi oleh para peneliti yang mengambil bagian tubuhnya tanpa persetujuannya? Karena dia tidak pernah ditanya, kita tidak akan pernah tahu.

Terlepas dari metode kultivasi, setelah virus dimasukkan ke dalam organisme inang, embrio, atau sel kultur jaringan secara keseluruhan, sampel dapat dibuat dari inang, embrio, atau garis sel yang terinfeksi untuk analisis lebih lanjut di bawah medan terang, elektron , atau mikroskop fluoresen. Efek sitopatik (CPE) adalah kelainan sel yang dapat diamati karena infeksi virus.

CPE dapat mencakup hilangnya perlekatan pada permukaan wadah, perubahan bentuk sel dari datar menjadi bulat, penyusutan nukleus, vakuola dalam sitoplasma, fusi membran sitoplasma dan pembentukan syncytia berinti banyak, badan inklusi dalam nukleus atau sitoplasma , dan lisis sel lengkap.

Perubahan patologis lebih lanjut termasuk gangguan virus dari genom inang dan mengubah sel normal menjadi sel yang berubah, yang merupakan jenis sel yang terkait dengan karsinoma dan sarkoma. Jenis atau tingkat keparahan CPE tergantung pada jenis virus yang terlibat. Gambar 6.21 mencantumkan CPE untuk virus tertentu.

Uji serologis digunakan untuk mendeteksi keberadaan jenis virus tertentu dalam serum pasien. Serum adalah fraksi cair plasma darah berwarna jerami yang faktor pembekuannya telah dihilangkan. Serum dapat digunakan dalam uji langsung yang disebut uji hemaglutinasi untuk mendeteksi jenis virus tertentu dalam sampel pasien. Hemaglutinasi adalah aglutinasi (penggumpalan) bersama eritrosit (sel darah merah).

Banyak virus menghasilkan protein permukaan atau paku yang disebut hemagglutinin yang dapat mengikat reseptor pada membran eritrosit dan menyebabkan sel menggumpal. Hemaglutinasi dapat diamati tanpa menggunakan mikroskop, tetapi metode ini tidak selalu membedakan antara partikel virus yang menular dan tidak menular, karena keduanya dapat mengaglutinasi eritrosit.

Untuk mengidentifikasi virus patogen tertentu menggunakan hemaglutinasi, kita harus menggunakan pendekatan tidak langsung. Protein yang disebut antibodi, yang dihasilkan oleh sistem kekebalan pasien untuk melawan virus tertentu, dapat digunakan untuk mengikat komponen seperti hemagglutinin yang secara unik terkait dengan jenis virus tertentu. Pengikatan antibodi dengan hemaglutinin yang ditemukan pada virus selanjutnya mencegah eritrosit berinteraksi langsung dengan virus.

Jadi ketika eritrosit ditambahkan ke virus berlapis antibodi, tidak ada penampakan aglutinasi; aglutinasi telah dihambat. Kami menyebut jenis uji tidak langsung ini untuk uji penghambatan hemaglutinasi antibodi spesifik virus (HAI). HAI dapat digunakan untuk mendeteksi keberadaan antibodi yang spesifik untuk berbagai jenis virus yang mungkin menyebabkan atau telah menyebabkan infeksi pada pasien bahkan berbulan-bulan atau bertahun-tahun setelah infeksi. Pengujian ini dijelaskan secara lebih rinci dalam Pengujian Aglutinasi.

Tes amplifikasi asam nukleat (NAAT) digunakan dalam biologi molekuler untuk mendeteksi urutan asam nukleat virus yang unik dalam sampel pasien. Polymerase chain reaction (PCR) adalah NAAT yang digunakan untuk mendeteksi keberadaan DNA virus dalam sampel jaringan atau cairan tubuh pasien. PCR adalah teknik yang memperkuat (yaitu, mensintesis banyak salinan) dari segmen DNA virus yang menarik. Menggunakan PCR, urutan nukleotida pendek yang disebut primer mengikat urutan spesifik DNA virus, memungkinkan identifikasi virus.

Reverse transcriptase-PCR (RT-PCR) adalah NAAT yang digunakan untuk mendeteksi keberadaan virus RNA. RT-PCR berbeda dari PCR karena enzim reverse transcriptase (RT) digunakan untuk membuat cDNA dari sejumlah kecil RNA virus dalam spesimen. cDNA kemudian dapat diamplifikasi dengan PCR. Baik PCR dan RT-PCR digunakan untuk mendeteksi dan mengkonfirmasi keberadaan asam nukleat virus pada spesimen pasien.

Michelle, seorang mahasiswa keperawatan berusia 21 tahun, datang ke klinik universitas dengan khawatir bahwa dia mungkin terkena penyakit menular seksual (PMS). Pasangan seksualnya baru-baru ini mengalami beberapa benjolan di pangkal penisnya. Dia sempat menunda pergi ke dokter, tapi Michelle curiga itu kutil kelamin yang disebabkan oleh HPV.

Dia sangat prihatin karena dia tahu bahwa HPV tidak hanya menyebabkan kutil tetapi juga merupakan penyebab utama kanker serviks. Dia dan pasangannya selalu menggunakan kondom untuk kontrasepsi, tetapi dia tidak yakin bahwa tindakan pencegahan ini akan melindunginya dari HPV.

Dokter Michelle tidak menemukan tanda-tanda fisik kutil kelamin atau penyakit menular seksual lainnya, tetapi menyarankan agar Michelle melakukan Pap smear bersama dengan tes HPV. Pap smear akan menyaring sel-sel serviks yang abnormal dan CPE yang terkait dengan HPV; tes HPV akan menguji keberadaan virus. Jika kedua tes negatif, Michelle dapat lebih yakin bahwa kemungkinan besar dia tidak terinfeksi HPV. Namun, dokternya menyarankan bahwa mungkin bijaksana bagi Michelle untuk mendapatkan vaksinasi HPV untuk melindungi dirinya dari kemungkinan paparan di masa depan.

Enzyme immunoassays (EIAs) mengandalkan kemampuan antibodi untuk mendeteksi dan menempel pada biomolekul spesifik yang disebut antigen. Antibodi pendeteksi menempel pada antigen target dengan tingkat spesifisitas yang tinggi dalam campuran yang kompleks dari biomolekul. Juga termasuk dalam jenis pengujian ini adalah enzim tidak berwarna yang melekat pada antibodi pendeteksi.

Enzim bertindak sebagai tag pada antibodi pendeteksi dan dapat berinteraksi dengan substrat tidak berwarna, yang mengarah pada produksi produk akhir berwarna. AMDAL sering bergantung pada lapisan antibodi untuk menangkap dan bereaksi dengan antigen, yang semuanya melekat pada filter membran. AMDAL untuk antigen virus sering digunakan sebagai tes skrining awal. Jika hasilnya positif, konfirmasi lebih lanjut akan memerlukan tes dengan sensitivitas yang lebih besar, seperti western blot atau NAAT. AMDAL dibahas secara lebih rinci dalam AMDAL dan ELISA.

Bersamaan dengan analisis RT/PCR, air liur David juga dikumpulkan untuk kultivasi virus. Secara umum, tidak ada tes diagnostik tunggal yang cukup untuk diagnosis antemortem, karena hasilnya akan tergantung pada sensitivitas pengujian, jumlah virion yang ada pada saat pengujian, dan waktu pengujian, sejak pelepasan virion dalam air liur. dapat bervariasi. Ternyata, hasilnya negatif untuk kultivasi virus dari air liur. Hal ini tidak mengherankan bagi dokter David, karena satu hasil negatif bukanlah indikasi mutlak tidak adanya infeksi. Mungkin jumlah virion dalam air liur rendah pada saat pengambilan sampel. Bukan hal yang aneh untuk mengulang tes pada interval untuk meningkatkan kemungkinan mendeteksi beban virus yang lebih tinggi.

 

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *